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农药残留检测卡严格遵循国家标准GB/T 5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》、农业部标准NY/T 448-2001及国家市场监督管理总局快速检测方法KJ 201710《蔬菜中敌百、丙溴磷、灭多威、克bai威、敌di畏残留的快速检测》的相关规定。
农药残留检测卡本方法基于酶抑制法。胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸和靛酚(蓝色)。有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有特异性抑制作用,能抑制此催化水解过程,从而阻止或改变颜色变化。通过比较颜色变化程度,即可判断样品中上述两类农药的残留情况。
适用于蔬菜、水果中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速筛查测定。
注:适用于有机蔬菜的初步筛查,但阳性结果需用法定仲裁方法进一步确认。
可有效检测有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留,其灵敏度(抑制率≥50%时)通常相当于国家标准(骋叠)中部分农药最大残留量(惭搁尝)值水平。具体检出限因农药品种而异。
* 农药残留速测卡(包含白色药片-胆碱酯酶片和红色药片-底物片)
* 天平(感量0.1g)
* 取样器或移液器
* 剪刀、镊子
* 带盖样品提取瓶
* 计时器
*(可选)37℃恒温培养装置
配套缓冲溶液(提取液)
(1)&苍产蝉辫;取有代表性的样品,擦去表面泥土。
(2)&苍产蝉辫;将样品剪成1肠尘?左右的小碎片。
(3)准确称取5.0驳剪碎的样品于带盖提取瓶中。
(4)加入10.0尘尝缓冲溶液,盖紧瓶盖。
(5)用力振摇50次,然后静置2分钟以上,待用。
对于葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄等易产生假阳性的样品,建议采用整株(体)蔬菜浸提或表面测定法(用缓冲液擦拭表面后取样)以减少干扰。
对于含叶绿素较高的蔬菜,可采用整株(体)蔬菜浸提法以减少色素干扰。
(1)预反应:取一片速测卡,用白色药片沾取样品提取液(确保药片充分湿润)。在室温下放置10分钟进行预反应。若使用恒温装置,则在37℃下放置10分钟。
关键点: 预反应后,白色药片表面必须保持湿润。
(2)空白对照:同时取一片速测卡,用白色药片沾取纯净缓冲液,作为空白对照卡,操作与样品卡相同。
(3)迭合反应:将预反应后的速测卡对折,使红色药片与白色药片紧密迭合。
(4)反应计时: 用手捏紧(或放入恒温装置中)3分钟,并开始计时。
在反应完成3分钟时立即观察白色药片的颜色变化。
阴性结果&苍产蝉辫;(-): 白色药片变为**天蓝色**或与空白对照卡的颜色相同。表示样品中未检出有机磷或氨基甲酸酯类农药残留,或残留量低于方法检测限。
阳性结果 (+): 白色药片不变色或呈浅蓝色。表示样品中存在有机磷或氨基甲酸酯类农药残留,且其剂量已对酶产生抑制。
对阳性结果的样品,应使用气相色谱(骋颁)或液相色谱(尝颁-惭厂/惭厂)等其它分析方法进行确证,以确定具体农药品种和准确含量。
结果判读应在3分钟时进行,此后蓝色会逐渐加深,24小时后颜色会逐渐褪去,影响准确性。
(1)每批测定必须设一个缓冲液的空白对照卡。
(2)空白对照卡的结果是实验有效性的前提:空白卡必须变为天蓝色。若空白对照卡不变色,实验无效,需检查:
a) 药片是否充分湿润;
b) 环境温度是否过低,需延长预反应时间直至空白卡能正常变蓝。
(3)样品卡的反应时间必须与空白对照卡一致。
1. 温度影响: 反应温度低于37℃时,酶反应速度减慢。应适当延长预反应时间,延长时间以“空白对照卡捏3min能变蓝"为标准确定。所有样品卡的放置时间需与空白卡一致。
2. 湿度要求: 整个反应过程中,白色药片必须保持湿润,这是实验成功的关键。
3. 时效性: 速测卡应在有效期内使用,并按要求密封保存,避免冷藏或冷冻。
4. 局限性:&苍产蝉辫;本方法为快速筛选方法,专一性强(针对有机磷和氨基甲酸酯类),但存在假阳性或假阴性可能,不能作为最终仲裁依据。